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From 2008.igem.org

Contents 1 Signal Molecule Receiver Phase 1.1 Quorum-Sensing Crosstalk 1.2 Plasmid Copynumber 1.3 LuxR mutant (Under construction) 2 Signal Molecule Quencher 2.1 more about AiiA Receiver Phase 2.2 more about AiiA Receiver Experiment

Signal Molecule Receiver Phase

English:

日本語:AHLを合成するSenderだけではなく、AHLを受け取る側のReceiverを変えれば、その応答時間を変えることができる。そこで私たちは、以下のいくつかの方法を考えた。

1. 一種類のSender（AHL<--LuxI）に対して、由来生物の異なるレシーバタンパク質でそれを受信する.
2. レシーバータンパク質であるLuxRに変異を入れることで、AHLに対する応答感度を上下させること.
3. レシーバーのコピーナンバーを変える.

Quorum-Sensing Crosstalk Fig.　 Crosstalk クオラムセンシングにおける、レシーバータンパクを変えてクロストークを起こさせる。 センダーを変えたときと同様に、他種生物由来のレシーバーでもAHLに応答することは知られている(1)(2)。 本来の組み合わせとは異なるAHLを受け取るレシーバーの応答時間は遅くなり、遺伝子発現が遅くなる。 more about Receiver phase crosstalk Fig.Time Delay Test LuxI-LuxR Fig.Time Delay Test LuxI-LasR Fig.Time Delay Test LuxI-RhlR more about experimental result

Plasmid Copynumber Fig. copynumber レシーバーのコピーナンバーを変えることで、応答までの時間を変える コピーナンバーを変えれば、レシーバーによるLuxRの合成量は変化する AHLを受け取るLuxRが変わるので応答閾値までの時間が変わるのだ more about Plasmid Copy number Fig. Time Delay Test クオラムセンシングに関わる遺伝子のベクタープラスミドのコピーナンバーを少なくすることで、遺伝子発現が遅くなる それと同時に、遺伝子発現の最大値自体も少なくなってしまう more about experimental result

LuxR mutant (Under construction)

レシーバータンパク質であるLuxRに変異を入れることで応答感度を上下させる^(3),(4)

Signal Molecule Quencher

Design

AHL reporter with aiiA Express LuxR and aiiA constantly. AiiA degrades AHL as signaling molecule. Express GFP when the AHL concentration exceed the capacity of aiiA. This enables the delay of the activation time of receiver. more about AiiA Receiver Phase

Fig.　 Time Delay Test more about AiiA Receiver Experiment

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