Team:Chiba/protocol/transformation/j

 >プロトコルページへ

Zコンピで形質転換

 * 1) 氷上でZ-competentcellsを融解
 * 2) １チューブにZ-competentcellsを30~50μLとplasmidを1μL加えタッピング. このときDNA溶液は全体の５％を超えないようにする. （plasmid溶液（100ng/μL）は1μL、ライゲーション産物は4μLぐらいが目安）
 * 3) 氷上で10分間置く.
 * 4) SocをZ-competentcellsに対して４倍程度加える. 特定の抗生物質への耐性遺伝子（マーカー）を持つ耐性菌でも、最初は分解酵素を持っていないため何もない培地で成長させる.
 * 5) 37℃で30～60分間低温しんとう.
 * 6) 各マーカーに対応したプレートへ植菌（plating）. platingする量はZ-competentcellsのcfuや、混合したplasimid量/状態によって変える.
 * 7) plateにテープなどをまきつけて、37℃で一晩培養する.