Team:Chiba/Calendar-Home/22 August 2008

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5. after irradiation(Sample:15min,4h,8h,12h)(Negative Control:0h,1h,4h,8h)  
5. after irradiation(Sample:15min,4h,8h,12h)(Negative Control:0h,1h,4h,8h)  
-
<BR>UV照射実験(液体編)(~24)
+
<BR>UV irradiation test(Liquid phase)(~24)
-
<BR>-Ptrc-LuxR-Plux-cI-colE1-Amp-,-PcI-GFP-p15a-Cm-(BW)の2plasmidを使用。
+
<BR>-Ptrc-LuxR-Plux-cI-colE1-Amp-,-PcI-GFP-p15a-Cm-(BW,2plasmid)
<BR>グリストをつついて2ml培養×2(LB-Amp,Cm)(LB-Amp,cm,AHL100nM)
<BR>グリストをつついて2ml培養×2(LB-Amp,Cm)(LB-Amp,cm,AHL100nM)
<BR>37°Cで、12h培養後、濁ったらそのまま小さなプレートにLB培地ごと移してUVを照射する。UVの波長は254nm,UVランプまでの距離は8cm。
<BR>37°Cで、12h培養後、濁ったらそのまま小さなプレートにLB培地ごと移してUVを照射する。UVの波長は254nm,UVランプまでの距離は8cm。
<BR>UVを照射して、15min,4h,8h,12h,たったら、両方のプレートからLB培地ごと20μlずつ採取しそれぞれ10<sup>5</sup>希釈し、そこから20μlをそれぞれ(LB-Amp,Cm)(LB-Amp,cm,AHL100nM)のプレートに撒いた。
<BR>UVを照射して、15min,4h,8h,12h,たったら、両方のプレートからLB培地ごと20μlずつ採取しそれぞれ10<sup>5</sup>希釈し、そこから20μlをそれぞれ(LB-Amp,Cm)(LB-Amp,cm,AHL100nM)のプレートに撒いた。
-
<BR>37°Cで12h培養した後のコロニー数
+
<BR>The number of colonies aftetr culturing at 37C for 12h.
<table width="200" border="4" cellpadding="0" cellspacing="0" bordercolor="#000000">
<table width="200" border="4" cellpadding="0" cellspacing="0" bordercolor="#000000">
<td width="257"></td>
<td width="257"></td>

Revision as of 00:19, 30 October 2008

>Home | Notebook

21 August 2008 <|> 23 August 2008

Contents

Laboratory work

Team:Input

Mini prep: Minipreped the cultures(<--21/8).

  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_R0051 BBa_R0051](2007)
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_R0051 BBa_R0051](2006)
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_J06650 BBa_J06650](2007)
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_J06650 BBa_J06650](2006)
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_J22136 BBa_J22136](2007)
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_J22141 BBa_J22141](2007)


insert check:Digestion

  1. [http://partsregistry.org/Part:BBa_J06650 BBa_J06650](2006)
  2. [http://partsregistry.org/Part:BBa_J06650 BBa_J06650](2007)
  3. [http://partsregistry.org/Part:BBa_J22136 BBa_J22136](2007)
  4. [http://partsregistry.org/Part:BBa_J22141 BBa_J22141](2007)
  5. [http://partsregistry.org/Part:BBa_R0051 BBa_R0051](2006)
  6. [http://partsregistry.org/Part:BBa_R0051 BBa_R0051](2007)


Sample No. 1-41-6
dH2O(μl)1425
10×BSA(μl) 710
10×NE(μl) 710
EcoRI(μl) 3.55
PstI(μl) 3.5-
Total(μl) 3550


UV irradiation test

  • two plasmids from ?
         o -Ptrc-LuxR-Plux-cI-colE1-Amp-
         o -PcI-GFP-p15a-Cm-(JW1908) 

1. Incubated cultures(from Glycerol Stocks) with 2mL of LB-Ampicillin Medium for 12 hours at 37 degrees.
2. moved the cultures to small plates and started UV-irradiation. (wavelength:254nm,distance from the UV lamp to the cultures were 8cm.)(Put the Negative control plate ina dark place. )
4. covered the plates with polyethylene wrap.
5. after irradiation(Sample:15min,4h,8h,12h)(Negative Control:0h,1h,4h,8h)


UV irradiation test(Liquid phase)(~24)
-Ptrc-LuxR-Plux-cI-colE1-Amp-,-PcI-GFP-p15a-Cm-(BW,2plasmid)
グリストをつついて2ml培養×2(LB-Amp,Cm)(LB-Amp,cm,AHL100nM)
37°Cで、12h培養後、濁ったらそのまま小さなプレートにLB培地ごと移してUVを照射する。UVの波長は254nm,UVランプまでの距離は8cm。
UVを照射して、15min,4h,8h,12h,たったら、両方のプレートからLB培地ごと20μlずつ採取しそれぞれ105希釈し、そこから20μlをそれぞれ(LB-Amp,Cm)(LB-Amp,cm,AHL100nM)のプレートに撒いた。


The number of colonies aftetr culturing at 37C for 12h.

no AHLAHL100nM
15min 1360
4h 4031
8h 100
12h 00


いづれのプレートもAHLが入っていないものはGFPが確認できたが、AHL100nMのものは確認できなかった。

Team:Communication

Transformation
competent cells : XL10G
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_J13002  BBa_J13002](2007)
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_J13002  BBa_J13002](2006)
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_J04500  BBa_J04500](2007)
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_J04500  BBa_J04500](2006)
(Locate & 2 Punch ~iyama ver.~)
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_C0076  BBa_C0076](2008) -> No colonies on plates
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_C0077 BBa_C0077](2008) -> No colonies on plates
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_C0078  BBa_C0078](2008) -> No colonies on plates
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_J04500 BBa_J04500](2008) -> No colonies on plates


--->(24/8)Mini prep

Team:Output

Mini prep

  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_J52008 BBa_J52008]
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_F2620 BBa_F2620]
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_T9002 BBa_T9002]
  • [http://partsregistry.org/Part:BBa_J33202 BBa_J33202]
  • PUC19
  • PGEX VENUS YFP(GST fusion)


Transformation

  • PGEX VENUS YFP(GST fusion)