1. Isolation of plasmids from cultures inocluated on previous day.
2. Control digest of isolated plasmids (pACYC177+omega_deltaA) with HindIII and SacI (7 from 8 colonies confirmed).
Sprawdzanie czy omp_omega_A_alfa daje oporność na AP Piotr
Zaszczepienie omp_omega_A_alfa z rużnych stężeń IPTG: 0; 0,1 ; 0,25 ; 0,5; 0,75; 1 do takich samych stężeń IPTG, ale z rużnymi stężeniami AP (25;50;75;100) w stosunku 1:50
wieczorem mieżenie OD
| ampicillin concentration (mikrogramy na mililitr): | IPTG concentration (milimole na mililitr): |
|---|
| 0 | 0,1 | 0,25 | 0,5 | 0,75 | 1 |
|---|
| 25 | 1,054 | 1,154 | 1,051 | 0,99 | 1,096 | 0,896 |
|---|
| 50 | 0,94 | 0,891 | 1,123 | 0,847 | 0,924 | 0,81 |
|---|
| 75 | 0.5 | 0,63 | 0.743 | 0.782 | 0.631 | 0.64 |
|---|
| 100 | 0.02 | 0,396 | 0.563 | 0.678 | 0.602 | 0.611 |
|---|
Sprawdzenie czy degradacja fuzji z Ompa jest wynikiem działania proteaz lon iompt (obecne w top10)
PIOTR
Transformacja omega_A_alfa i A_alfa do rosetta
|
 |
"
