Team:Chiba/notebook/input/september
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- | <BR>-Ptrc-LuxR-Plux-cI-colE1-Amp-,-PcI-GFP-p15a-Cm-の2plasmid(BW) | + | <BR>・-Ptrc-LuxR-Plux-cI-colE1-Amp-,-PcI-GFP-p15a-Cm-の2plasmid(BW) |
- | <BR> | + | <BR>・グリストをつついて2ml培養(UV⊕用と、UV⊖用の2本) |
- | <BR> | + | <BR>・37℃,12h後UV測定(UV⊕:5.21,UV⊖:5.38) |
- | <BR> | + | <BR>・小さなプレートにLB培地ごと流してUV照射開始。(UVは254nm,UVまでの距離は7.5cm,UV⊖のものは暗所に置いておく。) |
- | <BR> | + | <BR>・乾かないようにポリエチレン製サランラップで蓋をした。 |
- | <BR> | + | <BR>・UV⊕はUV照射後0min,10min,30min,1h,2h,4h,6h,8に、UV⊖は0h,1h,4h,8hによく攪拌してから、20μl採取。それぞれを |
- | <BR> | + | <BR>・10^4,10^5希釈し、20μlをプレートに撒いた。 |
- | <BR> | + | <BR>・37℃,12h後にコロニーを数える。 |
Revision as of 03:56, 25 September 2008
8月の実験ログはこちら
2008.9.1
・Ptet+RBS+cIの、Mini Prep産物の濃度チェック。
-Ptet-cI-pMB1-Amp-の機能チェック。
-Ptet-cI-pMB1-Amp-,-PcI-GFP-p15A-Cm-をDouble Transformation(BWΔflic)
結果→GFPが発現していた。
→-PcI-GFP-p15A-Cm-が機能していないのでは?
→ターミネーターをつける、pSB1A3にのせかえる。
-Ptet-cI-pMB1-Amp-のDigestion Check
混ぜ表
Double | Single | |
dH2O | 1 | 2 |
XbaI | 1 | 1 |
SpeI | 1 | - |
BSA(×10) | 1 | 1 |
NEB(×10) | 1 | 1 |
DNA | 5 | 5 |
TOTAL | 10 | 10 |
UV照射テスト
・-Ptrc-LuxR-Plux-cI-colE1-Amp-,-PcI-GFP-p15a-Cm-の2plasmid(BW)
・グリストをつついて2ml培養(UV⊕用と、UV⊖用の2本)
・37℃,12h後UV測定(UV⊕:5.21,UV⊖:5.38)
・小さなプレートにLB培地ごと流してUV照射開始。(UVは254nm,UVまでの距離は7.5cm,UV⊖のものは暗所に置いておく。)
・乾かないようにポリエチレン製サランラップで蓋をした。
・UV⊕はUV照射後0min,10min,30min,1h,2h,4h,6h,8に、UV⊖は0h,1h,4h,8hによく攪拌してから、20μl採取。それぞれを
・10^4,10^5希釈し、20μlをプレートに撒いた。
・37℃,12h後にコロニーを数える。