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<BR>混ぜ表
+
<BR>コロニー数
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<table width="200" border="4" cellpadding="0" cellspacing="0" bordercolor="#000000">
<td width="257"></td>
<td width="257"></td>

Revision as of 05:58, 25 September 2008

8月の実験ログはこちら


2008.9.1

・Ptet+RBS+cIの、Mini Prep産物の濃度チェック。
-Ptet-cI-pMB1-Amp-の機能チェック。
-Ptet-cI-pMB1-Amp-,-PcI-GFP-p15A-Cm-をDouble Transformation(BWΔflic)
結果→GFPが発現していた。
→-PcI-GFP-p15A-Cm-が機能していないのでは?
→ターミネーターをつける、pSB1A3にのせかえる。


-Ptet-cI-pMB1-Amp-のDigestion Check


混ぜ表

DoubleSingle
dH2O 12
XbaI 11
SpeI 1-
BSA(×10) 11
NEB(×10) 11
DNA 55
TOTAL 1010


UV照射テスト
・-Ptrc-LuxR-Plux-cI-colE1-Amp-,-PcI-GFP-p15a-Cm-の2plasmid(BW)
・グリストをつついて2ml培養(UV⊕用と、UV⊖用の2本)
・37℃,12h後UV測定(UV⊕:5.21,UV⊖:5.38)
・小さなプレートにLB培地ごと流してUV照射開始。(UVは254nm,UVまでの距離は7.5cm,UV⊖のものは暗所に置いておく。)
・乾かないようにポリエチレン製サランラップで蓋をした。
・UV⊕はUV照射後0min,10min,30min,1h,2h,4h,6h,8に、UV⊖は0h,1h,4h,8hによく攪拌してから、20μl採取。それぞれを
・10^4,10^5希釈し、20μlをプレートに撒いた。
・37℃,12h後にコロニーを数える。



コロニー数

--</td> <tr> <td>4h</td> <td>2</td><td>0</td><td>254</td><td>50</td> </tr> <tr> <td>6h</td> <td>0</td><td>0</td><td>-</td><td>-</td> </tr> <tr> <td>8h</td> <td>1</td><td>0</td><td>1155</td><td>106</td> </tr> </table>
UV⊕・10^4UV⊕・10^5UV⊖・10^4UV⊖・10^5
0min 42374271156
10min 30151--
30min 1397--
1h 895104054
2h 51