1. Separete transformant colonies (tranformation from previous day) inoculated to liquid LB with kanamycin.
2. Inoculation of pACYC177+OmpA_alpha and pACYC177+OmpA_omega - liquid LB with kanamycin.

Sprawdzanie czy omp_omega_A_alfa daje oporność na AP Piotr

Zaszczepienie omp_omega_A_alfa z rużnych stężeń IPTG: 0; 0,1 ; 0,25 ; 0,5; 0,75; 1 do takich samych stężeń IPTG, ale z rużnymi stężeniami AP (25;50;75;100) w stosunku 1:50

wieczorem mieżenie OD : tabelka

Zaszczepienie omp_omega_A_alfa na rużnych stężeń IPTG: 0; 0,1 ; 0,25 ; 0,5; 0,75 (do powtużenia )

Sprawdzenie ekspresji omp_omega_A_alfa i omp_A_alfa Piotr

Zwirowanie, zawieszenie, dodanie buforu lizującego (skład), zagotowanie, nałożenie na żel poliakryl, transfer na nitrocelulozę, blokowanie, przeciwciała anty-A, płukanie, przeciwciała anty-królik, wywołanie BCIP i NBT (omp_omega_A_alfa, z i bez indukcji, omp_A_alfa)

(Zdjęcie żelu)