Team:Chiba/Demo experiments

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Revision as of 12:08, 29 October 2008

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Demo Experiment ~Senders~

Method

プレ培養
1. 以下のグリストを各培養液2μL中にPickして37°Cでしんとう培養。
  1. LB-Amp, T9002(BW)
  2. LB-Amp+2‰Glu, [http://partsregistry.org/Part:BBa_K084012 BBa_K084012]([http://partsregistry.org/Part:BBa_J04500 plac+rbs]+[http://partsregistry.org/wiki/index.php?title=Part:BBa_C0161 LuxI(no LVA)]), (XL10G)
  3. LB-Amp+2‰Glu, [http://partsregistry.org/Part:BBa_K084007 BBa_K084007]([http://partsregistry.org/Part:BBa_J04500 plac+rbs]+[http://partsregistry.org/wiki/index.php?title=Part:BBa_C0178 LasI(no LVA)]), (XL10G)

本培養
1. プレ培養液を、

Results

結果は以下の通り。

*緑部分：LuxI　*赤部分：LasI

開始点

LuxIでGFP確認

LasIでもGFP確認

1枚目の写真は開始点。2枚目はLuxIの部分だけGFPを肉眼（蛍光灯光）で確認。３枚目はLuxIとLasI両方を確認したものです。

（それぞれ０時間、4時間、8時間後の映像。液量が100μLと少ないため、今までの実験（1000μL）での結果よりもGFP発現に時間がかかった。・・・コレ書かない方がいいのかなあ。）

Demo Experiment ~Receivers~

method

・receiverをLBで12hプレ培養し、colonyが1000位になるようにプレートに撒く。（プレート①）
・LBで12hプレ培養したsenderの菌液とLB-agar(50℃)を混ぜて(LB:LBagar=1:1)シャーレに流し込んで固まらせる。（プレート②）
・プレート②ができる頃にプレート①のreceiverのcolonyがちょうど良い大きさ(プレートに撒いて12hくらい)になるようにする。
・receiverのcolonyをニトロセルロースで写し取り、senderが入ったプレートの表面にはる。はったときからスタート。
・37℃で培養。
・決まった時間になったらUVを当ててGFPが見えるかチェックする。
香取