Team:Chiba/Sender experiments/Senders(JW1908) T9002(JW1908)

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Revision as of 17:06, 29 October 2008

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[http://partsregistry.org/Part:BBa_T9002 BBa_T9002 (Express GFP in response to AHL)]

Transformed Senders into E.coli strains(JW1908) and Receiver into E.coli strain(JW1908).
Inoculated them independently in liquid media. Incubated at 37°C 12h
Mixed them.
Incubated at 37°C or 30°C.
Measured intensity of green fluorescence at regular time intervals.

Fig.　　
12/09.E.coli strain,senders:JW1908,BBa_T9002:JW1908,37°C,Receiver cells/Sender cells = 1.

CinI+LVAの培養液を混ぜた反応液は、GFPの蛍光強度が上昇しなかった。BBa_K084010が働いていないか、クロストークが起こっていないことが考えられる。
CinI+LVA以外の3種の反応液は,すべて立ち上がりは同じであり(4時間後),LuxI,RhlIとLasIとで,最終到達蛍光強度に差が生じた.

Fig.　　
E.coli strain,senders:JW1908,BBa_T9002:JW1908,37°C,Receiver cells/Sender cells = 1.

Left:

立ち上がりの時間,最終蛍光強度ともに,ほとんど差が見られなかった.induction後,AHL濃度はすぐに閾値に達しており,どの反応液もgfpが成熟するのに伴い,蛍光強度が上昇していると考えた.

Right:

Fig.　　
E.coli strain,Senders:JW1908,BBa_T9002:JW1908,30°C,Receiver cells/Sender cells = 1.

Left:

Right:

Fig.　　
E.coli strain,senders:JW1908,BBa_T9002:JW1908,30°C,Receiver cells/Sender cells = 100.

Fig.　　
E.coli strain,senders:JW1908,BBa_T9002:JW1908,30°C,Receiver cells/Sender cells = 10.

Left:

Right:

Fig.　　
E.coli strain,senders:JW1908,BBa_T9002:JW1908,30°C,Receiver cells/Sender cells = 100.

Left:

Right:

LVAtagがついている場合,ついていないものより最終到達蛍光強度が小さくなった.LVAによってシンターゼが分解されていた.しかし,立ち上がりの時間は変化しなかった.これは,LVAによるシンターゼよりAHL合成の速度が速いために,AHLがすぐに閾値に達してしまっているためと考えた.閾値を超えると,すぐさまgfpの翻訳が始まり,inductionの2時間後には蛍光強度が上昇し始めた.

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 ====センダーの培養液：100&mu;L、レシーバの培養液：1000&mu;L====
-[[Image:Chiba_talks_JW1908_37_RS2_0912_01.gif‎|thumb|left|Fig.　　<br>E.coli strain,senders:JW1908,BBa_T9002:JW1908,37°C,Receiver cells/Sender cells = 10.]]
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 *センダーの培養液：10&mu;L、レシーバの培養液：1000&mu;L