1. Separete transformant colonies (tranformation from previous day) inoculated to liquid LB with kanamycin.
2. Inoculation of pACYC177+OmpA_alpha and pACYC177+OmpA_omega - liquid LB with kanamycin.
Sprawdzanie czy omp_omega_A_alfa daje oporność na AP Piotr
Zaszczepienie omp_omega_A_alfa z rużnych stężeń IPTG: 0; 0,1 ; 0,25 ; 0,5; 0,75; 1 do takich samych stężeń IPTG, ale z rużnymi stężeniami AP (25;50;75;100) w stosunku 1:50
wieczorem mieżenie OD :
| ampicillin concentration (mikrogramy na mililitr): | IPTG concentration (milimole na mililitr): |
|---|
| 0 | 0,1 | 0,25 | 0,5 | 0,75 | 1 |
|---|
| 25 | 1,558 | 1,469 | 1,587 | 1,49 | 1,566 | 1,311 |
|---|
| 50 | 1,425 | 1,435 | 1,524 | 1,055 | 0,920 | 0,935 |
|---|
| 75 | 1.09 | 0,989 | 1.447 | 0.971 | 0.951 | 0.992 |
|---|
Table 2. Results of testing various hunter/prey combinations
(ampicillin concentration 50-75 ug/ml).
Zaszczepienie omp_omega_A_alfa na rużnych stężeń IPTG: 0; 0,1 ; 0,25 ; 0,5; 0,75 (do powtużenia )
Sprawdzenie ekspresji omp_omega_A_alfa i omp_A_alfa Piotr
Zwirowanie, zawieszenie, dodanie buforu lizującego (skład), zagotowanie, nałożenie na żel poliakryl, transfer na nitrocelulozę, blokowanie, przeciwciała anty-A, płukanie, przeciwciała anty-królik, wywołanie BCIP i NBT (omp_omega_A_alfa, z i bez indukcji, omp_A_alfa)
(Zdjęcie żelu)
|
 |
"
