Team:Chiba/Calendar-Home/21 October 2008

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Team:Demo-Rs


朝　receiver(T9002)LB-Amp プレ培したものをプレートに撒く。コロニーが1000位になるように 　　sender(Ptet-LuxI)LB-Amp 10ml培養×3（①washなし、②washあり、③1:10-1:20or50-1:100）

夜　センダーが濁ったら②③はwash×3 　　①は菌液10mlにLB-agar10mlを加える。（Ampも） 　　②はwash後菌液10mlにLB-agarを10ml加える。（Ampも） 　　③(1:10)はwashした菌液を1mlとLB-Ampを9mlまぜ、そこにLB-agarを10ml加える。 　　　(1:20)はwashした菌液を0.5mlとLB-Ampを9.5mlまぜ、そこにLB-agarを10ml加える。 　　　(1:100)はwashした菌液を0.1mlとLB-Ampを9.9mlまぜ、そこにLB-agarを10ml加える。

　　また、ネガコンようとしてLB10mlと、LB-agar10mlを混ぜてプレートにしたものを用意する。

①②③、ネガコンをプレートに移して固まるまで待つ。固まったらreceiver(T9002)をプレートからニトロセルロースで写し取りそれぞれのプレートに2枚ずつはり、その時をスタートとして37℃の培養機の中にいれ、30分ごとにUVを当ててGFPが出ているかどうか確認する。



深夜　　T9002をtransformation

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