"
Team:Chiba/AiiA Receiver Phase
From 2008.igem.org
| Home | The Team | The Project | Parts Submitted to the Registry | Reference | Notebook | Acknowledgements |
|---|
AiiA Receiver
Fig. AiiA Receiver
Design
オートインデューサー不活性化酵素であるAiiAをレシーバー菌で発現させることにより、レシーバー菌内でのAHL濃度の増加が遅くなるため、AiiAを発現しないレシーバー菌に比べて、GFP発現が遅くなる。（小林）
Fig. AiiA Reaction
Experiment
- Sender
- Receivers
- AiiA Receiver
- non-AiiA Receiver
Method
- Transformed Sender into E.coli strains(BWΔFliC) and Receivers into E.coli strain(BWΔFliC).
- Inoculated them independently in liquid media. Incubated at 37c°； 12h.
- Inoculated again at 37c°； upto about OD600=2.0
- Washed them.
- Mixed them (Sender:Receiver=1000μl:1000μl).
- Incubated at 30°C.
- Measured intensity of green fluorescence at regular time intervals.
result
Fig.Time Delay Test
24時間後の蛍光強度を比較すると最大強度は1/4に下がっている。
transfer curveがシグモイドではなく、時間に比例するようになった
AiiAを発現させると、GFPの発現自体が極端に減ってしまったので、AHL自体を減らしてしまうと発現量の最大値が小さくなってしまう。
conclusion
| Home | The Team | The Project | Parts Submitted to the Registry | Notebook |
|---|
