Team:Chiba/jk/γ/Trl

From 2008.igem.org

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(Protocol)
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== Time Responce Liquid ==
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==Time Responce Liquid==
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'''目的'''
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<br> '''装置&試薬'''
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<br>インダクションをかけてから一番出力が早いパーツをさがす。
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<br>*装置
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'''装置&試薬'''
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<br>:*46穴(Deep Well)
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*装置
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<br>:*しんとうき
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:*しんとう培養器(37℃,30℃)  
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<br>:*OD測定値
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:*46 well plate(deep well)  
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<br>:*96穴Plate
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Fluoroskan Ascent 2.5(program:Ascent Software Version 2.6)
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<br>:*蛍光リーダー
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<br>*試薬
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<br>:*IPTG(pLacの場合)
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<br>:*AHL(pLuxの場合)
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<br>:*X-gal(LacZの場合)
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<br>:*M9
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<br>:*PBS
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<br>'''プロトコル'''
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<br>*Pre培
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<br>:LB培養液(2ml)に固体培地から大腸菌をpickし37℃で12時間培養(48穴Deep Well)
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<BR>*本培
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<BR>:ODを計測し1/200に希釈しOD=0.01から1.0になるまで培養
 +
<br>:OD=1.0になったら生理食塩水でwash(2.0min 8,000rpm)x2
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<br>:M9またはPBSで培養し、IPTG,AHLを加え計測する。
 +
<br>:0min,30min,60min,90min,120min,,,,,240minまで蛍光リーダー、OD値計測
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<br>:また、肉眼で確認
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<br>*[[TEam:Chiba/jk/γ/TrI/0828|Result(28,August,2008)]]
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<br>*[[TEam:Chiba/jk/γ/TrI/0905|Result(5,September,2008)]]
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<br>*[[TEam:Chiba/jk/γ/TrI/0910|Result(10,September,2008)]]
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<br>*[[TEam:Chiba/jk/γ/TrI/0914|Result(14,September,2008)]]

Revision as of 02:52, 29 September 2008

Time Responce Liquid


装置&試薬
*装置
:*46穴(Deep Well)
:*しんとうき
:*OD測定値
:*96穴Plate
:*蛍光リーダー
*試薬
:*IPTG(pLacの場合)
:*AHL(pLuxの場合)
:*X-gal(LacZの場合)
:*M9
:*PBS


プロトコル
*Pre培
:LB培養液(2ml)に固体培地から大腸菌をpickし37℃で12時間培養(48穴Deep Well)
*本培
:ODを計測し1/200に希釈しOD=0.01から1.0になるまで培養
:OD=1.0になったら生理食塩水でwash(2.0min 8,000rpm)x2
:M9またはPBSで培養し、IPTG,AHLを加え計測する。
:0min,30min,60min,90min,120min,,,,,240minまで蛍光リーダー、OD値計測
:また、肉眼で確認


*Result(28,August,2008)
*Result(5,September,2008)
*Result(10,September,2008)
*Result(14,September,2008)