Team:Chiba/jk/γ/Trl

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==Time Responce Liquid==
==Time Responce Liquid==
<br> '''装置&試薬'''
<br> '''装置&試薬'''
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<br>*装置
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*装置
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<br>:*46穴(Deep Well)
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<br>:*しんとうき
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<br>:*OD測定値
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<br>:*96穴Plate
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<br>:*蛍光リーダー
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<br>*試薬
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*試薬
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<br>:*IPTG(pLacの場合)
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:*IPTG(pLacの場合)
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<br>:*AHL(pLuxの場合)
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:*AHL(pLuxの場合)
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<br>:*X-gal(LacZの場合)
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:*X-gal(LacZの場合)
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<br>:*M9
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:*M9
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<br>:*PBS
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:*PBS
<br>'''プロトコル'''
<br>'''プロトコル'''
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<br>*Pre培
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*Pre培
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<br>:LB培養液(2ml)に固体培地から大腸菌をpickし37℃で12時間培養(48穴Deep Well)
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:LB培養液(2ml)に固体培地から大腸菌をpickし37℃で12時間培養(48穴Deep Well)
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<BR>*本培
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*本培
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<BR>:ODを計測し1/200に希釈しOD=0.01から1.0になるまで培養
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:ODを計測し1/200に希釈しOD=0.01から1.0になるまで培養
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<br>:OD=1.0になったら生理食塩水でwash(2.0min 8,000rpm)x2
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:OD=1.0になったら生理食塩水でwash(2.0min 8,000rpm)x2
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<br>:M9またはPBSで培養し、IPTG,AHLを加え計測する。
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:M9またはPBSで培養し、IPTG,AHLを加え計測する。
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<br>:0min,30min,60min,90min,120min,,,,,240minまで蛍光リーダー、OD値計測
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:0min,30min,60min,90min,120min,,,,,240minまで蛍光リーダー、OD値計測
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<br>:また、肉眼で確認
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:また、肉眼で確認
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<br>*[[TEam:Chiba/jk/γ/TrI/0828|Result(28,August,2008)]]
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*[[TEam:Chiba/jk/γ/TrI/0828|Result(28,August,2008)]]
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<br>*[[TEam:Chiba/jk/γ/TrI/0905|Result(5,September,2008)]]
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*[[TEam:Chiba/jk/γ/TrI/0905|Result(5,September,2008)]]
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<br>*[[TEam:Chiba/jk/γ/TrI/0910|Result(10,September,2008)]]
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*[[TEam:Chiba/jk/γ/TrI/0910|Result(10,September,2008)]]
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<br>*[[TEam:Chiba/jk/γ/TrI/0914|Result(14,September,2008)]]
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*[[TEam:Chiba/jk/γ/TrI/0914|Result(14,September,2008)]]

Revision as of 02:54, 29 September 2008

Time Responce Liquid


装置&試薬

  • 装置
  • 46穴(Deep Well)
  • しんとうき
  • OD測定値
  • 96穴Plate
  • 蛍光リーダー
  • 試薬
  • IPTG(pLacの場合)
  • AHL(pLuxの場合)
  • X-gal(LacZの場合)
  • M9
  • PBS


プロトコル

  • Pre培
LB培養液(2ml)に固体培地から大腸菌をpickし37℃で12時間培養(48穴Deep Well)
  • 本培
ODを計測し1/200に希釈しOD=0.01から1.0になるまで培養
OD=1.0になったら生理食塩水でwash(2.0min 8,000rpm)x2
M9またはPBSで培養し、IPTG,AHLを加え計測する。
0min,30min,60min,90min,120min,,,,,240minまで蛍光リーダー、OD値計測
また、肉眼で確認