Team:Chiba/protocol/DNA Purification/zymocleam/j
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+ | #クリーンしたいDNA溶液にBinding Bufferを加えてピペッティングしたものをカラムに移して1分間遠心(13,000rpm)。 | ||
+ | #カラムのチューブにたまった溶液を捨てて、チューブの水気を取ってからカラムをつける。 | ||
+ | #DNAが入った溶液がなくなるまでこの操作を繰り返す。 | ||
+ | #Wash Bufferを200μL入れて1分間遠心(13,000rpm)。カラムを洗浄する。 | ||
+ | #カラムのチューブにたまった溶液を捨てて、チューブの水気を取ってからカラムをつける。 | ||
+ | #4~5の操作をあと2回(合計3回)繰り返す。この時カラムの向きが3回とも異なるように意識する。 | ||
+ | #3分間空遠心(13,000rpm)。完全にEtha-OHをとばす。 | ||
+ | #新しいチューブにカラムを移して、1~2分放置する。 | ||
+ | #NFWをシリカに吸わせ、1分以上放置しDNAを溶出する。 | ||
+ | #1分間遠心(13,000rpm)し、カラムをはずしてチューブの蓋を閉めたらザイモ完了! | ||
+ | #余談だがサブクロ中にザイモを失敗したメンバーには『うざいも!』と声をかけて励ましてあげよう。 |
Latest revision as of 13:55, 15 December 2008
Zymoクリーン
- クリーンしたいDNA溶液にBinding Bufferを加えてピペッティングしたものをカラムに移して1分間遠心(13,000rpm)。
- カラムのチューブにたまった溶液を捨てて、チューブの水気を取ってからカラムをつける。
- DNAが入った溶液がなくなるまでこの操作を繰り返す。
- Wash Bufferを200μL入れて1分間遠心(13,000rpm)。カラムを洗浄する。
- カラムのチューブにたまった溶液を捨てて、チューブの水気を取ってからカラムをつける。
- 4~5の操作をあと2回(合計3回)繰り返す。この時カラムの向きが3回とも異なるように意識する。
- 3分間空遠心(13,000rpm)。完全にEtha-OHをとばす。
- 新しいチューブにカラムを移して、1~2分放置する。
- NFWをシリカに吸わせ、1分以上放置しDNAを溶出する。
- 1分間遠心(13,000rpm)し、カラムをはずしてチューブの蓋を閉めたらザイモ完了!
- 余談だがサブクロ中にザイモを失敗したメンバーには『うざいも!』と声をかけて励ましてあげよう。