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Team:Chiba/protocol/PCR/j
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#増幅したいDNAまたはそれが含まれているDNA断片、Thermopol Buffer、dNTP Mix、プライマー（２種）、DNAポリメラーゼ（酵素）、水をPCR用チューブに入れる。この時は量の少ない順に添加していくが、DNAポリメラーゼは失活する恐れがあるため一番最後に入れる。 | #増幅したいDNAまたはそれが含まれているDNA断片、Thermopol Buffer、dNTP Mix、プライマー（２種）、DNAポリメラーゼ（酵素）、水をPCR用チューブに入れる。この時は量の少ない順に添加していくが、DNAポリメラーゼは失活する恐れがあるため一番最後に入れる。 | ||
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Start: 94 °C for 5 min. (melt) | Start: 94 °C for 5 min. (melt) | ||
cycle: melt: 1 min. | cycle: melt: 1 min. | ||
Latest revision as of 13:34, 15 December 2008
PCR
- DNA特定部位上にある塩基配列を調べ、２種のプライマー（Foward・Reverese）を作成。
- 増幅したいDNAまたはそれが含まれているDNA断片、Thermopol Buffer、dNTP Mix、プライマー（２種）、DNAポリメラーゼ（酵素）、水をPCR用チューブに入れる。この時は量の少ない順に添加していくが、DNAポリメラーゼは失活する恐れがあるため一番最後に入れる。
- PCRロボサイクルの設定をして操作完了です。以下は設定例。
Start: 94 °C for 5 min. (melt)
cycle: melt: 1 min.
anneal : 30 sec.
cycle end: extension:72 °C for 3.5 min.
25 cycles
72 °C for 10 min
store: keep at 6 °C forever
