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Line 7:		Line 7:
	Time Delay Test		Time Delay Test
-	#T9002(Ptet) -p15a-Kan(BW)	+	#[http://partsregistry.org/Part:BBa_T9002 BBa_T9002](BW)
	#Plac-RhlI -Amp(BW)		#Plac-RhlI -Amp(BW)
	#Plac-LasI -Amp(BW)		#Plac-LasI -Amp(BW)
Line 19:		Line 19:
	4LB-Amp　2ml培養		4LB-Amp　2ml培養
-	↓over night	+	-->over night
	*本培		*本培
-	50ml遠心管に①の菌液100μlとLB-Kanを20mlを加える。	+	50ml遠心管に(1)の菌液100μlとLB-Kanを20mlを加える。
-	50ml遠心管に②、③それぞれの菌液10μlとLB-Amp 0.2%グルコースをそれぞれに6mlを加える。	+	50ml遠心管に(2)、(3)それぞれの菌液10μlとLB-Amp 0.2%グルコースをそれぞれに6mlを加える。
-	50ml遠心管に④のLB-Ampを6mlを加える。	+	50ml遠心管に(4)のLB-Ampを6mlを加える。
	OD>2となったらWash		OD>2となったらWash
-	*①に関して	+	*(1)に関して
-	①	+	(1)
-	↓冷却遠心(3700rpm,3min)	+	-->冷却遠心(3700rpm,3min)
	上澄みを捨てる		上澄みを捨てる
Line 43:		Line 43:
-	*②③④に関して	+	*(2)~(4)に関して
-	②、③、④	+	(2),(3),(4)
-	↓冷却遠心(3700rpm,3min)	+	-->冷却遠心(3700rpm,3min)
	上澄みを捨てる。		上澄みを捨てる。
Line 53:		Line 53:
	LBを2ml加える。		LBを2ml加える。
-	:::↓冷却遠心(3700rpm,3min)	+	:::-->冷却遠心(3700rpm,3min)
	上澄みを捨てる。		上澄みを捨てる。
Line 59:		Line 59:
	LBを2ml加える。		LBを2ml加える。
-	:::↓冷却遠心(3700rom,3min)	+	:::-->冷却遠心(3700rom,3min)
	上澄み捨てる。		上澄み捨てる。

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Revision as of 19:43, 29 October 2008

>Home | Notebook

12 September 2008 <|> 14 September 2008

Contents 1 Laboratory work 1.1 Team:Input 1.2 Team:Communication 1.3 Team:Output

Laboratory work

Team:Input

Time Delay Test

1. [http://partsregistry.org/Part:BBa_T9002 BBa_T9002](BW)
2. Plac-RhlI -Amp(BW)
3. Plac-LasI -Amp(BW)
4. Ptet-LuxI -Amp(BW)

• pre-culture

1. LB-Kan 2ml培養

2,3:LB-Amp -0.2%グルコース 2ml培養

4LB-Amp　2ml培養

-->over night

• 本培

50ml遠心管に(1)の菌液100μlとLB-Kanを20mlを加える。

50ml遠心管に(2)、(3)それぞれの菌液10μlとLB-Amp 0.2%グルコースをそれぞれに6mlを加える。

50ml遠心管に(4)のLB-Ampを6mlを加える。

OD>2となったらWash

• (1)に関して

(1)

-->冷却遠心(3700rpm,3min)　　　　　　　　　　

上澄みを捨てる

LB-Kanを20ml加える。　　　　　　　　　　　　

• (2)~(4)に関して

(2),(3),(4)

-->冷却遠心(3700rpm,3min)

上澄みを捨てる。

LBを2ml加える。　　　　　　　　　　　　

-->冷却遠心(3700rpm,3min)

上澄みを捨てる。

LBを2ml加える。

-->冷却遠心(3700rom,3min)

上澄み捨てる。

LB-Ampを6ml加える。

48-well plate(Deep Well)

1:2ml	2:2ml,AHL	2:2ml	3:2ml	4:2ml	-
-	-	-	-	-	-
1:1ml,2:1ml,IPTG:2μl	1:100μl,2:1ml,IPTG:1.1μl	110μl,21ml,IPTG:101μl	1:1μl,21ml,IPTG:1.001μl	1:1ml,2:100μl,IPTG:1.1μl	1:1ml,2:10μl,IPTG:1.01μl
-	-	-	-	-	-
1:1ml,3:1ml,IPTG:2μl	1:100μl,3:1ml,IPTG:1.1μl	1:10μl,3:1ml,IPTG:1.01μl	1:1μl,3:1ml,IPTG	1:1ml,3:100μl,IPTG:1.1μl	1:1ml,3:10μl,IPTG:1.01μl
-	-	-	-	-	-
1:1ml,4:1ml,IPTG:2μl	1:100μl,4:1ml,IPTG:1.1μl	1:10μl,4:1ml,IPTG:1.0μl	1:1μl,4:1ml,IPTG:1.001μl	1:1ml,4:100μl,IPTG:1.0μl	1:1ml,4:10μl,IPTG1.01μl
-	-	-	-	-	-

Team:Communication

Gel Check

1. [http://partsregistry.org/Part:BBa_Co161 BBa_C0161](2007)
2. [http://partsregistry.org/Part:BBa_J04500 BBa_J04500](2007)
3. [http://partsregistry.org/Part:BBa_R0010 BBa_R0010](2007)

Sample No. 1~3 Sample DNA(μL) 1 Loading Dye(μL) 1 dH2O(μL) 4 TOTAL(μL) 6 From left;

-->Digestion

1. [http://partsregistry.org/Part:BBa_Co161 BBa_C0161](2007)
2. [http://partsregistry.org/Part:BBa_J04500 BBa_J04500](2007)
3. [http://partsregistry.org/Part:BBa_R0010 BBa_R0010](2007)

Sample No.	①	②	③	④
Sample DNA(μL)	5	5	1	1
EcoRⅠ(μL)	0.5	o.5	-	-
SpeⅠ(μL)	0.5	0.5	-	-
Buffer 1(μL)	1	1	-	-
Buffer 3(μL)	-	-	1	-
BSA(μL)	1	1	-	-
dH2O(μL)	2	2	7.5	-
TOTAL(μL)	10	10	10	1

Team:Output

no work

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